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GriSP自誘導(dǎo)培養(yǎng)基Auto Induction Media原理介紹

更新時(shí)間:2023-04-01   點(diǎn)擊次數(shù):1800次

Auto Induction Media自動(dòng)誘導(dǎo)培養(yǎng)基(AIM)所有組分已被配制混合好,用于IPTG誘導(dǎo)的表達(dá)菌株的生長(zhǎng),最初無(wú)需誘導(dǎo),然后自動(dòng)誘導(dǎo)靶蛋白的產(chǎn)生,確保通常在高細(xì)胞密度下接近密度飽和。有限濃度的葡萄糖在生長(zhǎng)過(guò)程中優(yōu)先代謝,這阻止了乳糖的攝取,直到葡萄糖耗盡,通常在對(duì)數(shù)期的中后期。當(dāng)葡萄糖耗盡時(shí),乳糖可以被β-半乳糖苷酶吸收并轉(zhuǎn)化為誘導(dǎo)劑allolactose。Allolactose導(dǎo)致lac阻遏因子從DNA中的特定結(jié)合位點(diǎn)釋放,從而誘導(dǎo)lacUV5啟動(dòng)子中T7 RNA聚合酶的表達(dá)并解斷T7lac啟動(dòng)子,允許T7 RNA聚合酶表達(dá)靶蛋白。


使用AIM培養(yǎng)基,高密度細(xì)胞生長(zhǎng)之后是蛋白質(zhì)表達(dá)的自發(fā)誘導(dǎo)。無(wú)需監(jiān)測(cè)細(xì)胞密度(OD值),也無(wú)需使用IPTG進(jìn)行常規(guī)誘導(dǎo)。 AIM培養(yǎng)基的原理是基于培養(yǎng)基中的碳源,這些碳源經(jīng)過(guò)差異代謝,以促進(jìn)高密度細(xì)胞生長(zhǎng)并自動(dòng)誘導(dǎo)啟動(dòng)子的蛋白表達(dá)。


許多非誘導(dǎo)或自動(dòng)誘導(dǎo)培養(yǎng)物的平行生長(zhǎng)是可行的,因?yàn)榕囵B(yǎng)物只需接種并生長(zhǎng)至飽和。 與傳統(tǒng)的IPTG誘導(dǎo)相比,這是一種極大的便利,簡(jiǎn)化了多個(gè)克隆的手動(dòng)或自動(dòng)誘導(dǎo)和分析,傳統(tǒng)的IPTG誘導(dǎo)需要監(jiān)測(cè)每種培養(yǎng)物的生長(zhǎng)并在適當(dāng)?shù)纳L(zhǎng)階段添加誘導(dǎo)劑。


GriSP的自誘導(dǎo)培養(yǎng)基Auto Induction Media,給蛋白誘導(dǎo)表達(dá)帶來(lái)極大的便利。實(shí)驗(yàn)中常見(jiàn)的忘記檢測(cè)細(xì)胞OD值而錯(cuò)過(guò)添加誘導(dǎo)劑IPTG的事情時(shí)長(zhǎng)發(fā)生。而自誘導(dǎo)培養(yǎng)基可以讓這些問(wèn)題終結(jié)。細(xì)菌培養(yǎng),誘導(dǎo)表達(dá)想做就做,隨時(shí)做。葡萄牙GriSP品牌聯(lián)合靶點(diǎn)科技,提供大量現(xiàn)貨,給國(guó)內(nèi)科研人員的蛋白誘導(dǎo)表達(dá)實(shí)驗(yàn)添磚加瓦。

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GriSP自誘導(dǎo)培養(yǎng)基Auto Induction Media系列包含:LB Broth(AIM), 2YT BrothAIM, Terrific BrothAIM 和 Super BrothAIM共4種?,F(xiàn)貨聯(lián)系靶點(diǎn)科技。


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